Percobaan isolasi, purifikasi, kinetika, dan karakterisasi enzim invertase dilakukan untuk mengisolasi enzim invertase dari ragi (yeast). Enzim yang telah diisolasi dimurnikan, dipelajari studi kinetikanya, serta diperkirakan bobot molekulnya dengan metode yang telah banyak digunakan pada penelitian-penelitian sebelumnya.
Enzim invertase diisolasi dari ragi Saccharomyces cerevisiae menghasilkan tiga fraksi dengan kadar protein dan aktivitas yang berbeda. Kadar protein diuji dengan metode Lowry, sedangkan aktivitas enzim dilihat berdasarkan jumlah gula pereduksi yang terbentuk, diukur dengan metode Nelson’s. Kadar protein tertinggi ditunjukkan oleh fraksi I sebesar 511.372 mg/mL dan terendah pada fraksi III sebesar 3.423 mg/mL. Aktivitas terendah pada fraksi I yaitu 0.0288 unit enzim invertase/mL, sedangkan aktivitas tertinggi ditunjukkan pada fraksi III yaitu 0.2442 unit enzim invertase/mL. Studi kinetika enzim invertase dilakukan berdasarkan pengaruh konsentrasi substrat terhadap laju reaksi dan aktivitas enzim. Reaksi berjalan mengikuti orde nol dengan nilai Km sebesar -0.044 mM-1 dan Vmaks sebesar 8.899 x 10-4. Reaksi menghasilkan persamaan Michaelis-Menten y = 0.001x + 0.001 serta persamaan Lineweaver-Burk y = -6.113x + 41.30. Perkiraan bobot molekul dilakukan dengan metode Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE). Diperoleh rata-rata bobot molekul enzim invertase fraksi I sebesar 34788.21, fraksi II sebesar 22792.92, dan fraksi III sebesar 33984.30.
Biaya akses penuh: Rp0,- Download File belum tersedia!
0 comments:
Poskan Komentar